液相色譜儀是屬于易學(xué)難用的儀器,特別講究“正確使用”和使用經(jīng)驗(yàn)。此外,因?yàn)橐合嗌V儀是一種精密型儀器,在維護(hù)與保養(yǎng)、維修方面有著較高的要求。因此,使用人員掌握儀器故障原因或能更好的幫助自身使用儀器。
液相工作人員接觸最多的應(yīng)該是流動(dòng)相,流動(dòng)相是造成液相色譜各種問題的主要源頭。其中,“堵”是液相色譜儀常見的故障。
“堵”的表現(xiàn)現(xiàn)象是柱壓異常升高,直接原因是流路不暢。堵塞的主要位置是在色譜柱的前端,主要原因是流動(dòng)相里有雜質(zhì),雜質(zhì)的主要來源是細(xì)菌。
具體來說,“堵”的原因大概有三種,其一是配制流動(dòng)相時(shí)細(xì)菌污染。首先,我們要認(rèn)識(shí)到,一般的國(guó)產(chǎn)甲醇不需要額外過濾處理,直接使用沒有問題,正容易引起問題的,是水中的細(xì)菌。新制備的純水在室內(nèi)放置幾天會(huì)長(zhǎng)菌,而這些細(xì)菌雖然肉眼不可見,卻足以堵塞柱填料顆粒的空隙,造成柱子很快報(bào)廢。這是在配制流動(dòng)相時(shí)造成的細(xì)菌污染的原因,解決它的方法很簡(jiǎn)單,確保水的可靠性。如,購買實(shí)驗(yàn)室專用純水機(jī),購買市售品牌純凈水。
其二,使用流動(dòng)相時(shí)的細(xì)菌污染。簡(jiǎn)單來說就是流動(dòng)相剛開始沒有長(zhǎng)菌,在使用時(shí)卻產(chǎn)生了細(xì)菌污染。這主要是在使用多元液相色譜儀時(shí)的一種不良使用習(xí)慣造成的,如50%的甲醇水流動(dòng)相,有兩種使用方式,一種方式是在上機(jī)前配好混合在一起,另一種方式是在流路A放純甲醇,流路B放純水。從單純實(shí)驗(yàn)效果來說,后一種有明顯的優(yōu)點(diǎn),但純水在流動(dòng)相瓶中幾天時(shí)間會(huì)長(zhǎng)細(xì)菌。因此,這種方式要求操作人員每次實(shí)驗(yàn)都要用新制備的純水,更要求在每次實(shí)驗(yàn)后把水相換掉,換成甲醇沖洗干凈,但多次使用中總有一兩次會(huì)遺漏。
其三,不適當(dāng)操作。常見問題的有以下幾種:在更換零件時(shí)選擇的型號(hào)有誤,接口不是很匹配,在擰緊的時(shí)候產(chǎn)生變形而使得管路堵塞;樣品處理液凈化得不干凈,長(zhǎng)期會(huì)在六通閥和柱之間形成阻塞不暢;在使用手動(dòng)六通閥時(shí),有些人可能由于手勁小的原因,轉(zhuǎn)動(dòng)的不到位,于是造成流路形成了死堵,壓力快速升高超過警戒值;在使用金屬管路作出廢液管時(shí),應(yīng)當(dāng)注意先在廢液瓶中放一些水,并把廢液管的出口端放在液面下。
查堵的方法是從尾向前逆向分段拆開,仔細(xì)觀察壓力數(shù)值,如果液相色譜儀某一個(gè)部件(柱子除外)裝上和拆下時(shí)的壓力差別很大,可發(fā)展變化判斷。至于柱的堵塞,可以通過換同樣規(guī)格的柱的壓力是否一致來判斷。